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ESTABLISHMENT AND CHARACTERIZATION OF CHIMERIC HUMANMURINE TUMOR CELL LINES STABLY EXPRESSING HUMAN M-CSF AND ITS RECEPTOR

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Author:
No author available
Journal Title:
JOURNAL OF LEUKEMIA & LYMPHOMA
Issue:
1
DOI:
10.3760/cma.j.issn.1009-9921.2003.01.001
Key Word:
巨噬细胞集落刺激因子;巨噬细胞集落刺激因子受体;人-鼠嵌合肿瘤细胞系;实验模型

Abstract: 目的:建立稳定表达人巨噬细胞集落刺激因子受体(M-CSFR)或人巨噬细胞集落刺激因子受体-膜结合型巨噬细胞集落刺激因子(M-CSFR-m-M-CSF)的人-鼠嵌合肿瘤细胞系,作为研究肿瘤免疫治疗的实验模型.方法:用PCR技术构建M-CSFR-m-M-CSF融合cDNA的真核表达载体.将携带M-CSFR及M-CSFR-m-CSF的重组质粒转染小鼠骨髓瘤细胞系SP2/0,G418筛选所得的混合克隆,有限稀释后克隆化培养.结果:得到3株稳定表达人M-CSFR和4株稳定表达人M-CSFR-m-M-CSF的嵌合肿瘤细胞系.ABC免疫酶标法和RT-PCR法证实所获细胞系有明显的目的蛋白表达.皮下接种BALB/c小鼠成瘤率100%.结论:建立了稳定表达人M-CSFR或人M-CSFR-m-M-CSF的人-鼠嵌合肿瘤细胞系,并已成功地用于M-CSF及其受体DNA疫苗免疫效应的研究.其原理和方法可供同类研究工作借鉴.

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