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Establishment of 293 cell line with stable expression of EGFR and its biological character

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Author:
No author available
Journal Title:
CHINESE JOURNAL OF BIOMEDICAL ENGINEERING
Issue:
3
DOI:
10.3760/cma.j.issn.1674-1927.2007.03.005
Key Word:
表皮生长因子受体;293细胞系;基因转染

Abstract´╝Ü 目的 建立稳定表达野生型表皮生长因子受体(EGFR)全长的293细胞系.方法 通过脂质体瞬间转染的方法将含有EGFR全长的质粒转染293细胞系.利用抗生素筛选的方法使转染阳性的细胞扩增,单克隆化,进一步稳定传代.通过Western印迹的方法挑选高表达克隆,进而使用MTT法测细胞增殖活性.反复传代、冻存、复苏鉴定表达的稳定性.结果 获得1株稳定表达EGFR的293细胞系,命名为WT293,且转染前后细胞生长速度存在差异.结论 pcDNA3.1(一)载体能够作为稳定表达的载体用于筛选.稳定表达EGFR的293细胞系为配体受体相互作用及靶向EGFR的抗肿瘤药物作用机制的研究提供了实验素材和理论依据.

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