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Barrier function of porcine retinal pigment epithelial cells cultured in vitro

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Author:
No author available
Journal Title:
CHINESE JOURNAL OF OCULAR FUNDUS DISEASES
Issue:
3
DOI:
10.3760/j.issn:1005-1015.2006.03.012
Key Word:
色素上皮,眼/生理学;细胞培养;血视网膜屏障

Abstract: 目的研究体外培养的猪眼视网膜色素上皮(RPE)细胞的血视网膜外屏障功能.方法对猪眼RPE细胞进行原代培养,第3代细胞接种于微孔滤器,微孔滤器的滤膜为无聚乙烯吡咯酮(PVP)聚碳酸脂膜(polycarbonate),分别于培养1、2、3、4周对滤膜表面行光学显微镜观察,于培养后2周对膜切面行光学显微镜和透射电子显微镜观察;行跨膜电阻测定并用荧光素钠和辣根过氧化物酶(HRP)进行通透性检测.结果成功原代培养了猪眼RPE细胞.光学显微镜观察结果显示,RPE细胞接种1周后,细胞基本汇合,接种后2、3周时RPE细胞密度无明显变化,接种后4周时细胞密度下降;滤膜及细胞标本切面观察结果显示,RPE细胞可在滤膜表面表现出单层有极性生长的特性;接种于微孔滤器2周后,RPE细胞跨上皮细胞电阻达(97.44±11.36)Ω/cm2,并至少持续到接种后3周;通透性检测结果显示,孵育30 min后只有0.27%的荧光素钠和0.17%的HRP从滤膜上方到达下方,分子量小的荧光素钠比分子量大的HRP通透率高.结论应用无PVP聚碳酸脂膜的微孔滤器可以建立体外RPE细胞有极性单层生长的模型,并用于屏障功能的研究.

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