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Growth inhibitory effects of lipofectamine-mediated DCC gene on ovarian epithelial carcinoma

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Author:
No author available
Journal Title:
CHINESE JOURNAL OF OBSTETRICS AND GYNECOLOGY
Issue:
3
DOI:
10.3760/j.issn:0529-567X.2006.03.012
Key Word:
卵巢肿瘤;基因,DCC;转染;基因疗法

Abstract: 目的探讨脂质体介导的DCC基因对卵巢上皮性癌(卵巢癌)细胞系SKOV3细胞生长的抑制作用.方法通过目的基因克隆、载体构建技术,将DCC基因重组于pcDNA3.1(+)质粒中,构建pcDNA3.1(+)-DCC质粒,并通过脂质体介导,将此质粒转染入SKOV3细胞中(即SKOV3/DCC细胞).实验分为3组,DCC基因转染组(SKOV3/DCC组)、空载体转染组(SKOV3/Neo组)和空白对照组(SKOV3组).RT-PCR技术和免疫组化染色方法检测3组细胞中DCC mRNA和蛋白的表达,并观察细胞集落形成率、生长速度、细胞周期等生物学行为变化.结果 RT-PCR技术和免疫组化染色方法检测显示,外源性DCC基因通过基因重组及脂质体介导,已整合于SKOV3细胞并获稳定表达.SKOV3/DCC组细胞的生长速度较SKOV3和SKOV3/Neo组减慢,分别比较,差异均有统计学意义(P<0.01).SKOV3/DCC组细胞克隆数为(38±8)个,分别与SKOV3和SKOV3/Neo组[分别为(192±8)、(186±10)个]比较,差异均有统计学意义(P<0.01).细胞周期分析显示,SKOV3/DCC组,G1期细胞占78.0%,S期细胞占5.3%,与SKOV3/Neo组(分别为20.0%、3.2%)比较,差异有统计学意义(P<0.01).电镜观察显示,SKOV3/DCC组细胞超微结构出现生长受到抑制的特征.结论 DCC基因可明显抑制卵巢癌细胞生长,可能在卵巢癌发生、发展的过程中起重要作用.

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