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Expression of p15INK4B gene induced by arsenic trioxide in esophageal cancer cell line EC109

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Author:
No author available
Journal Title:
WORLD CHINESE JOURNAL OF DIGESTOLOGY
Issue:
19
DOI:
10.3969/j.issn.1009-3079.2006.19.002
Key Word:
亚砷酸;p15INK4B;甲基化;食管癌

Abstract´╝Ü 目的:研究亚砷酸(As2O3)对人食管癌EC109细胞株细胞周期蛋白依赖性激酶抑制因子p15INK4B(p15)基因表达的影响.方法:终浓度2μmo1/L的As2O3加入食管癌EC109细胞系,采用甲基化特异PCR(MSP)检测食管癌EC109细胞系中p15基因甲基化,采用RT-PCR和Western blot方法检测As2O3处理前后p15的mRNA和蛋白质水平的表达情况.用Scion Image软件测量条带灰度值,P15蛋白与ACTB条带的灰度比进行半定量分析.结果:EC109细p15基因发生高甲基化,p15基因不表达.As2O3作用后p15基因甲基化程度明显下降,As2O3作用72,48,24 h组和未加药组之间差异均有统计学意义(37.1 1±3.62,50.92±5.47,72.07±7.53vs97.23±9.80,P<0.05).As2O3作用24 h后出现p15 mRNA表达,随As2O3作用时间延长p15 mRNA表达逐渐增强,各个时间组之间比较,除了未加药组和加药24 h组之间及加药24 h组和加药48h组之间差异无统计学意义外,其余各个时间组之间差异有统计学意义(0.72±0.07 vs 0.58±0.06 vs 0.48±0.07 vs 0.41±0.08,P<0.05).As2O3作用24 h后P15蛋白出现表达,2μmo1/L作用24-72 h中P15蛋白条带灰度逐渐增强,As2O3作用72,48,24 h组和未加药组之间差异均有统计学意义(0.51±0.02 vs0.21±0.01 vs 0.16±0.02 vs 0.06±0.01,P<0.05),说明其表达随As2O3作用时间延长而逐渐增强.结论:As2O3可使食管癌EC109细胞p15基因去甲基化,使p15基因表达上调,从而抑制细胞周期进程.

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