Abstract： 目的：建立大肠癌细胞中提取和测定5-Fu含量的HPLC方法，并观察药物浓度、时间及给药次数与大肠癌细胞内5-Fu含量的关系。方法：用0．1％氢氧化钠裂解大肠癌细胞后用乙醚-异丙醇(8：2)提取细胞内5-Fu，HPLC法测定大肠癌细胞内5-Fu含量。分析条件：Spherisorb C18柱，流动相：0．05 mol／L磷酸盐缓冲液，紫外检测波长：265 nm。结果：5-Fu进样量在0．000526μg～0．420 8μg之间呈良好线性关系，线性方程为Y=3154159X-408．89，r=0．999 7；5-Fu的最小检测限为5．26 ng；5-Fu不同加入量的的平均回收率分别为82．15％和87．50％；重复性试验RSD=6．72％。结论：用HPLC法测定大肠癌细胞中5-Fu含量的方法是可行的；大肠癌细胞对5-Fu的摄取可能存在“饱和现象”，当给药浓度达到一定量(5μg／mL)时，癌细胞中5-Fu含量最高。