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Effect of small interfering RNA directed against telomerase on the proliferation and apoptosis of Hut78 cells
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- Author:
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- Journal Title:
- CHINESE JOURNAL OF DERMATOLOGY
- Issue:
- 6
- DOI:
- 10.3760/j.issn:0412-4030.2007.06.003
- Key Word:
- 端粒,末端转移酶;RNA,小分子干扰;细胞凋亡;肿瘤细胞,培养的;淋巴瘤
Abstract： 目的 探讨针对端粒酶逆转录酶(hTERT)基因的小干扰RNA(siRNA)技术对皮肤T细胞淋巴瘤(CTCL)细胞株Hut78端粒酶活性和细胞生长的影响.方法 用T7 RNA聚合酶介导的体外转录法合成两对hTERT-siRNA,将合成的siRNA转入Hut78细胞中,用端粒酶重复序列扩增及酶联免疫吸附方法(TRAP-PCR-ELISA)和逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)分别检测Hut78细胞端粒酶活性及hTERTmRNA的表达.用MTF法和流式细胞仪分析细胞增殖及凋亡的变化.结果 将合成的siRNA(250 ng)转染入Hut78细胞48 h后,端粒酶活性被明显抑制,抑制率分别为68%和64%;hTERT mRNA的表达下降.细胞生长抑制作用有明显的剂量依赖性,以1000 ng剂量抑制效果最明显.同时观察到细胞凋亡,凋亡率分别为15.86%和11.10%(P＞0.05).结论 体外转录法合成的hTERT-siRNA能明显抑制Hut78细胞端粒酶的活性,降低hTERT基因表达,抑制细胞生长增殖及诱导细胞凋亡.
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