Abstract： 目的 探讨以基质金属蛋白酶(MMP)9基因为靶向的RNA干扰(RNAi)技术对MMP-9基因在卵巢上皮性癌(卵巢癌)细胞中表达的抑制作用,以及对卵巢癌细胞侵袭和黏附能力的影响.方法 以MMP-9基因为靶基因,在编码区选择4个不同的目标序列,分别为Site1、Site2、Site3、Site4及1个非特异性序列Site5,利用PCR方法构建小分子干扰RNA(siRNA)表达元件,转染卵巢癌HO-8910PM细胞,并依据序列不同将细胞分组,分别为Site1、Site2、Site3、Site4和Site5组,另以未转染的母代细胞作为对照组.利用RT-PCR、蛋白印迹法检测MMP-9 mRNA及蛋白的表达,通过四甲基偶氮唑蓝法绘制细胞生长曲线,细胞侵袭重建基底膜实验检测细胞体外侵袭能力,通过细胞黏附实验检测细胞体外黏附能力.结果 Site1、Site2、Site3、对照组细胞MMP-9 mRNA的相对表达水平分别为0.64±0.06、0.47±0.07、0.55±0.10、0.91±0.08,蛋白的相对表达水平分别为0.30±0.09、0.27±0.08、0.37±0.12、0.63±0.09,与对照组细胞比较,Site1、Site2、Site3组MMP-9 mRNA和蛋白的相对表达水平均有不同程度的下降(P＜0.05),针对Site2序列的siRNA的基因抑制效果最好.细胞生长曲线显示,Site1、Site2、Site3、Site4组细胞的生长不同程度的减慢.Site1、Site2、Site3组细胞的侵袭抑制率分别为50.0%、50.0%和37.5%,均高于对照组细胞(0),分别与对照组比较,差异均有统计学意义(P＜0.05).Site1、Site2、Site3、Site4组细胞60min时的黏附抑制率分别为43.8%、48.8%、33.9%和24.2%,90 min时的黏附抑制率分别为41.6%、40.2%、35.1%和16.0%,黏附抑制率均高于对照组(0),差异有统计学意义(P＜0.05).结论 卵巢癌HO-8910PM细胞中存在RNAi现象,MMP-9siRNA能特异性地抑制MMP-9基因的表达,使卵巢癌细胞的侵袭和黏附能力受到不同程度的影响.