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The Establishment of the Apoptotic Model of Cultured Human Adult Cardiomyocytes

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Author:
No author available
Journal Title:
JOURNAL OF CHINESE PHYSICIAN
Issue:
7
DOI:
10.3760/cma.j.issn.1008-1372.2004.07.001
Key Word:
成人心肌细胞;细胞培养;缺氧;细胞凋亡

Abstract: 目的建立缺氧诱导体外培养的成人心肌细胞凋亡情况.方法用胰蛋白酶和胶原酶进行消化,用差速黏附贴壁法、Brdu加入和人为破坏成纤维细胞法纯化心肌细胞,用IMDM培养基培养,4~6d后将体外培养的成人心肌细胞置于3%氧气、92%氮气及5%二氧化碳孵箱中,6、12、24、48h缺氧后再恢复正常条件培养4h,造成缺氧损伤所致细胞凋亡模型,分别用倒置显微镜、电镜、TUNEL法技术检测凋亡发生的情况.结果心肌细胞经历缺氧损伤后,倒置显微镜、电镜、TUNEL染色均观察到凋亡阳性细胞.TUNEL法定量检测,心肌细胞缺氧培养6、12、24、48h后,其凋亡率分别为:(3.3±0.9)%、(8.3±1.8)%、(16.1±2.6)%和(19.4±2.3)%.结论心肌细胞凋亡率随着缺氧时间的延长而增高,认为缺氧一定时间可以诱导体外培养的成人心肌细胞凋亡.

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