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Optimization of Radioligand Assays for Islet Autoantibodies
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- Author:
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- Journal Title:
- JOURNAL OF CHINESE PHYSICIAN
- Issue:
- 6
- DOI:
- 10.3760/cma.j.issn.1008-1372.2004.06.005
- Key Word:
- 1型糖尿病;胰岛自身抗体;放射配体检测法
Abstract： 目的对谷氨酸脱羧酶抗体(GAD-Ab)、蛋白酪氨酸磷酸酶抗体(IA-2A)、胰岛素自身抗体(IAA)检测条件进行优化分析,使之更好地在临床上推广应用.方法采用我所自建的放射配体检测法,对抗原抗体的孵育方式与时间、缓冲液pH值与洗涤次数、以及离心机类型选择进行优化分析,并通过参加国际糖尿病免疫学会(IDS)第3次糖尿病自身抗体标准化检测方法评估(DASP 2003),以及与国内商品化放射免疫试剂盒比较,评价优化后方法的灵敏度与特异性.结果优化后的检测条件为:采用缓慢旋转孵育的方式使GAD-Ab、IA-2A抗原与血清孵育24h,IAA孵育72h,采用pH 7.2～7.4的TBST缓冲液对GAD-Ab 、IA-2A沉淀复合物洗涤4次,对IAA沉淀复合物洗涤5次,以及采用水平转头低温离心机;DASP 2003结果回报显示,检测条件优化后GAD-Ab灵敏度82%,特异性98%.IA-2A灵敏度64%,特异性100%.82例IAA指数呈梯度排列的标本检测结果与国内放射免疫试剂盒一致率89%,指数＜0.04或＞1.00的标本两方法检测一致率100%,不符合的标本均为优化后方法检测为低滴度阳性(指数在0.04～1.00)而试剂盒检测阴性.结论优化后的胰岛自身抗体放射配体检测法灵敏度和特异性好,可在临床广泛应用.
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