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Distribution and efficiency of recombinant adenovirus mediated human stem cell leukemia gene transfer in mice with interstitial cells of Cajal loss
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- Author:
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- Journal Title:
- CHINESE JOURNAL OF GASTROINTESTINAL SURGERY
- Issue:
- 2
- DOI:
- 10.3760/cma.j.issn.1671-0274.2007.02.005
- Key Word:
- 便秘,慢传输型;腺病毒载体;基因,干细胞白血病;基因疗法;同源重组;Cajal间质细胞
Abstract： 目的 研究绿色荧光蛋白(GFP)标记的人干细胞白血病基因(SCL)重组腺病毒载体的快速构建及在Cajal间质细胞(ICC)缺失模型鼠体内的分布和表达,为进一步研究慢传输型便秘(STC)的基因治疗奠定基础.方法 利用Ad-Easy系统、细菌内同源重组法快速构建重组腺病毒Ad-GFP/SCL.经尾静脉注射1.6×109 PFU的重组腺病毒给ICC缺失模型Balb/c小鼠,在不同的时相点检测重组腺病毒在小鼠心、肺、肝、脾、肾、小肠及结直肠组织内的分布和表达;苏木精-伊红染色法观察重组腺病毒的体内毒性;RT-PCR法分析重组腺病毒介导的SCL mRNA在各脏器内的表达.结果 通过荧光显微镜观察,在不同时期可以观察到小鼠心、肺、肝、脾、肾、小肠及结直肠组织内有不同程度的GFP表达:苏木精-伊红染色法显示各脏器未见明显毒性反应;RT-PCR法分析显示各脏器均有不同程度的SCL mRNA表达.结论 成功构建的重组腺病毒Ad-GFP/SCL可介导SCL基因在ICC缺失模型Balb/c小鼠体内安全、稳定地表达,为进一步在体研究STC的基因治疗奠定了基础.
- [1]赵峰,周清华,覃扬,等.突变k-ras基因重组腺病毒的构建[J].2002,(1).
- [2]Gambardella L,Green AR,Sanchez MJ,etc.Selective rescue of early haematopoietic progenitors in Scl(-/-) mice by expressing Scl under the control of a stem cell enhancer.[J].2001,128(23).
- [3]Torihashi S,Nakayama S,Fujimoto T,etc.Calcium oscillation linked to pacemaking of interstitial cells of Cajal: requirement of calcium influx and localization of TRP4 in caveolae.[J].2002,277(21).
- [4]Malysz J,Szurszewski JH,Ermilov LG,etc.Physiological study of interstitial cells of Cajal identified by vital staining.[J].2002,14(2).
- [5]da-Costa LT,He TC,Yu J,etc.A simplified system for generating recombinant adenoviruses.[J].1998,95(5).