Abstract： 目的完成胃壁细胞分离及纯化,建立原代培养胃壁细胞的方法. 方法制备大鼠翻转的胃囊用含链霉蛋白酶E的消化液注入胃囊内孵育,并用磁力搅拌器轻轻搅拌而制备单个的胃底腺细胞,Percoll梯度离心富集胃壁细胞,用含100 mL*L-1血清的PBS培养液,时差贴壁去除成纤维细胞,然后,将壁细胞接种于培养板中,培养液用无血清的1∶1 Harm's F-12/DMEM培养,内含胰岛素5 mg*L-1,氢化可地松4 μg*L-1,转铁蛋白5 mg*L-1,硒酸钠5 μg*L-1,牛血清白蛋白2 g*L-1,表皮生长因子25 μg*L-1,葡萄糖1.98 g*L-1持续培养可达1 wk以上. 结果获得的壁细胞经吖啶橙(acridine orange,AO)鉴定纯度达80%以上,原代培养经HE染色可见壁细胞呈分散小组式生长,且生长状态良好. 结论此方法适宜于大鼠胃壁细胞的分离及体外培养,为体外进一步研究壁细胞的功能打下基础.